被称为“粉红杀手”的乳腺癌，是全球发病率仅次于肺癌的第二大常见癌症，也是女性发病率和死亡率均居首位的恶性肿瘤。自1985年起，每年十月被确立为乳腺癌防治月（BCAM），旨在提升全球对乳腺癌预防、治疗和早期筛查的重视。

HER2靶向治疗在乳腺癌领域已历经多轮演进。2019年，抗体药物偶联物T-DXd（德曲妥珠单抗，Enhertu）获批上市，为克服上一代ADC药物T-DM1的耐药问题提供了新思路。该药物所携带的细胞毒性载荷DXd具备跨膜扩散能力，不仅能精准靶向HER2高表达的癌细胞，还可通过旁观者效应杀伤邻近的HER2阴性肿瘤细胞，展现出卓越疗效。然而，随着临床应用的拓展，部分患者仍出现获得性耐药，因此构建可靠的临床前耐药模型成为推进后续研究的关键。小编此前已盘点乳腺癌研究中常用临床前模型的构建策略与应用场景。详见：每年新发病例已达230万！这5类乳腺癌小鼠模型是最优选

针对Enhertu耐药研究中模型缺失的问题，药康生物采用体内与体外联合诱导策略，成功在BALB/c-Nude小鼠中构建了JIMT-1-Enhertu-R稳定耐药模型。动物体内实验证实，在3 mg/kg Enhertu治疗下，该模型肿瘤未出现明显抑制（图1），显示出稳定的耐药特性。

图1. JIMT-1-Enhertu-R 的体内耐药验证

体外细胞杀伤实验证明，JIMT-1-Enhertu-R对Enhertu游离毒素Dxd的耐受程度显著提高，但仍保留着对MMAE的敏感度（图2）。

图2. 不同毒素在JIMT-1 patrntal、JIMT-1-Enhertu-R细胞中IC50检测

流式细胞术HER2表达可见，JIMT-1-Enhertu-R细胞株及JIMT-1-Enhertu-R肿瘤瘤块中HER2表达水平未见明显下降（图3）。

图3. 体外、体内模型JIMT-1与JIMT-1-Enhertu-R 中HER2表达鉴定

基于上述结果，推测该耐药机制可能与细胞对载荷敏感性降低有关，而非由靶点丢失引起，提示其存在对其他ADC药物产生交叉耐药的潜在可能。

为进一步模拟临床耐药情况，药康生物开发了Enhertu耐药的增强版本：经诱导获得的JIMT-1-Enhertu-R模型，在6 mg/kg甚至10 mg/kg的Enhertu干预下仍未显现药效（图4），表现出对高剂量药物的持续耐受。

图4. 高剂量Enhertu在JIMT-1-Enhertu-R Enhanced模型中的药效测试

肿瘤组织免疫组化结果显示，与亲本JIMT-1模型相比，耐药模型中HER2表达保持稳定高水平（图5）。

图5. HER2 在 JIMT-1 WT 和 JIMT-1-Enhertu-R肿瘤组织中的IHC染色结果

Enhertu的耐药机制涉及多层面因素，包括ADC载荷耐药突变、HER2表达变化、药物递送、细胞内处理、外排泵活化、信号通路旁路激活及肿瘤微环境免疫逃逸等。在成功构建耐药模型的基础上，药康生物通过RNA-seq测序对潜在机制进行了初步探索（图6）。

图6. 差异基因火山图

差异基因分析显示，与亲本组织相比，JIMT-1-Enhertu-R Enhanced模型中多个基因表达发生改变：SLC46A3表达下调，提示药物内吞或溶酶体释放效率可能降低；ABCG2等外排蛋白上调，可能通过加速药物外排降低细胞内浓度；PLK1、TACC3等有丝分裂相关基因上调，表明肿瘤细胞或在DNA损伤下仍能维持分裂进程。这些基因为临床克服Enhertu耐药提供了潜在的生物标志物和干预靶点。

药康生物已建立多种肿瘤耐药模型平台，覆盖免疫检查点抑制剂耐药、ADC药物诱导耐药、EGFR-TKI耐药等多个方向，建模手段包括自发耐药、体内外诱导及基因编辑等。部分模型已开放应用，其余也在持续开发中，以支持全球抗肿瘤药物创新研究。具体资源信息如下：

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