在科研的广袤天地中，动物实验是生物科技领域不可或缺的一环。对于实验动物外科手术而言，麻醉是首要且关键的第一步，它直接关系到实验的成败与动物福利的保障。但在实际操作中，这看似简单的一步，却让不少同学频频踩坑。今天，我们就来详细聊聊小鼠麻醉那些事儿，帮助大家顺利跨越这一关键环节。

小鼠麻醉的常用方法及药物选择

（一）吸入麻醉法

1. 适用场景

吸入麻醉法常用于需快速诱导麻醉、精确控制麻醉深度、用时较长的外科手术及需快速苏醒的动物实验，如小鼠的活体成像、采血等。其优势在于起效快，并且麻醉深度可根据实验需求灵活调整。例如，在进行小鼠短期生理指标测量时，吸入麻醉可以快速让小鼠安静，方便操作，结束后小鼠能迅速苏醒，减少对动物身体的影响，安全性较高 ^[1]。

2. 常用药物

吸入麻醉剂主要包括异氟烷、七氟烷等。以异氟烷为例，它具有呼吸刺激小、血气分配系数低的特点，诱导迅速、麻醉平稳且苏醒快，是较为理想的麻醉剂。操作时需使用呼吸麻醉机：先将小鼠置于诱导箱内，以4%-5%的浓度进行诱导麻醉；待进入外科手术期（呼吸循环稳定，反射抑制）后，将浓度降至1%-2%维持，并通过面罩或鼻锥持续供气 ^[2]。

左图：吸入麻醉设备；右图：麻醉废气抽排净化装置

（二）注射麻醉法

1. 适用场景

注射麻醉法适用于时长1小时内的手术、不具备气体麻醉条件的情况，或如解剖、组织取材等终点实验。该方法麻醉效果稳定，单次麻醉可持续30-60分钟 [1]。

2. 常用药物

氯胺酮 + 赛拉嗪：安全性高、可逆性强，适用于中短时手术（如开腹、植瘤）。常规剂量为氯胺酮80–100 mg/kg + 赛拉嗪5–10 mg/kg（腹腔注射）[3]。赛拉嗪为α2受体激动剂，具镇静、肌松和镇痛作用，可增强麻醉效果并减少氯胺酮副作用；其拮抗剂阿替美唑可用于快速逆转麻醉 [4]。

舒泰+赛拉嗪：推荐剂量为舒泰55–75 mg/kg + 赛拉嗪5–10 mg/kg（腹腔注射），外科麻醉时长约20–50分钟。注意该方案存在药物相互作用风险：与吩噻嗪类（如乙酰丙嗪）联用会抑制心肺功能并导致低温；与氯霉素合用影响代谢清除。价格较高，属国家弱管制药品，宠物临床常用而易得，但实验动物需谨慎评估不良反应。

阿佛丁（三溴乙醇）：常用剂量400 mg/kg（腹腔注射），麻醉维持约15–45分钟。溶液稳定性差，放置后易产生毒性物质且pH下降，显著增加死亡率。不良反应包括胃肠液分泌增多、腹膜粘连、肠梗阻及呼吸心脏抑制；雌鼠敏感性更高。属非医用级麻醉剂，安全窗窄，需现配现用，并经兽医与IACUC批准后使用。

（三）局部麻醉法

局部麻醉药通过可逆性阻断神经细胞膜上的电压门控Na⁺通道，抑制冲动传导，从而实现手术区域镇痛。常用药物如利多卡因和布比卡因，多通过粘膜表面（如鼻、眼）或局部浸润注射给药。

利多卡因的推荐剂量为4 mg/kg（相当于1%溶液0.4 mL/kg），起效快但作用时间短，总剂量不应超过7 mg/kg；布比卡因推荐剂量为1–2 mg/kg（0.25%溶液0.4–0.8 mL/kg），起效较慢但作用更持久，总剂量不宜超过6 mg/kg。

在手术切口等疼痛刺激前使用局麻药，可作为重要的辅助镇痛手段。与阿片类或非甾体抗炎药等全身性镇痛药联用，可构建多模式镇痛方案，增强效果并减少全身用药副作用。但由于单次给药通常仅维持数小时，一般不推荐将其作为术后唯一的镇痛方式，而应纳入整体疼痛管理计划，并严格注意用药安全。

新手常遇到的麻醉失败问题及原因剖析

（一）剂量计算失误

许多新手在计算麻醉剂剂量时容易出现错误。小鼠的体重差异是影响麻醉剂量的关键因素，每增加1g体重，麻醉剂量可能就需要重新计算。例如，氯胺酮与赛拉嗪联合用药时，常按氯胺酮100mg/kg和赛拉嗪10mg/kg的剂量给药。一只20g的小鼠需要氯胺酮2mg和赛拉嗪0.2mg，而一只30g的小鼠则需要氯胺酮3mg和赛拉嗪0.3mg。如果忽略了体重差异，按照固定剂量给药，很可能导致麻醉过深或过浅。麻醉过深会抑制小鼠的呼吸和循环系统，甚至导致死亡；麻醉过浅则会使小鼠在实验过程中苏醒，影响实验进行，还会给小鼠带来痛苦^[2]。

（二）混合麻醉剂使用不当

使用氯胺酮与赛拉嗪等混合麻醉剂时，部分操作者易忽略其混合后的稳定性问题。该类混合物易分解，必须现配现用。若提前配制并存放过久，药物可能失效，导致麻醉效果不足，无法使小鼠达到所需麻醉深度[3]。

（三）术前准备不足

1. 环境因素

麻醉前需注意环境温度。小鼠适宜温度为20–26℃，若温度过低，麻醉状态下易出现低体温。这是因为麻醉会抑制其体温调节中枢，导致自我保温能力下降。低体温不仅影响生理状态、延长苏醒时间，还可能引起实验数据偏差^[1]。

2. 禁食问题

小鼠因生理结构不易呕吐，通常麻醉前无需禁食。但若误操作而禁食过久，会因其新陈代谢快而导致体质下降，麻醉耐受性降低，从而增加麻醉风险^[4]。

符合动物福利和伦理审查要点的麻醉策略

（一）麻醉剂药物选择的考量

在选择麻醉剂时，需充分考虑动物福利与伦理要求。例如，水合氯醛曾为常用麻醉剂，但后续研究表明其本质上属于镇静催眠药，镇痛效果差、刺激性较强，且毒副作用较大，易引起动物呼吸抑制和心血管功能下降等问题，还会干扰实验结果，不符合动物福利与伦理审查原则，因此目前多数实验已不再采用^[5]。

三溴乙醇（阿佛丁）虽能提供有效的镇痛（痛觉阻断率>95%），符合减少动物痛苦的优化原则，但其溶液稳定性差、安全窗窄，并可能引起腹膜粘连等风险（详见‘注射麻醉法’部分）。因此，使用必须格外谨慎，并需获得伦理委员会批准。建议剂量：小鼠为1.25%浓度，0.18-0.19 mL/10g；大鼠为2.5%浓度，0.1 mL/10g。

三溴乙醇试剂瓶

（二）术后护理措施的重要性

1. 体温维持

小鼠麻醉苏醒期间需使用加热垫维持体温，成年小鼠的垫温宜设置在35–37℃以确保有效复温，避免低温应激。注意不可将动物直接接触热源，应垫隔平板纸等材料，以防烫伤^[1]。

用加热垫给苏醒小鼠保温实拍图

2. 苏醒监测

应持续监测小鼠直至完全恢复。苏醒期间宜将小鼠置于铺有纸巾（避免使用垫料）的干净笼中，以降低气道阻塞或肺炎风险。恢复过程中需持续保温，待其可自主活动后再放回原笼，并提供饲料与饮水^[4]。若小鼠接受手术，为防止同笼伙伴啃咬缝线或损伤切口，可能需术后单独饲养，该安排应提前在实验方案中说明，并获IACUC（实验动物管理与使用委员会）批准^[5]。

小鼠麻醉是一项需要严谨对待的技术活，从麻醉方法和药物的选择，到避免常见的麻醉失败问题，再到严格遵循动物福利和伦理审查要点，每一步都关乎实验的顺利开展和动物的福祉。希望同学们通过这篇指南，能够在小鼠麻醉操作上更加得心应手，让科研之路少一些阻碍，多一份保障。

参考文献

[1] 孙敬方。动物实验方法学 [M]. 北京：人民卫生出版社，2001: 156-162.

[2] 魏泓。实验动物学 [M]. 北京：科学出版社，2019: 213-218.

[3] Fish R E, Brown M A, Danneman P J, et al. Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals[M]. 2nd ed. San Diego: Academic Press, 2008: 345-351.

[4] National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals[M]. Washington, D C: The National Academies Press, 2011: 127-133.

[5] 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会。实验动物福利伦理审查指南（GB/T 35892-2018）[S]. 北京：中国标准出版社，2018.

[6] Kitagawa Y, Tsuji T, Yamada K. Evaluation of tribromoethanol as an anesthetic agent for mice[J]. Experimental Animals, 2007, 56(2): 143-148.

[7] 实验动物那些事儿. 《小鼠麻醉指导原则》. 2024.